Dalla sua formazione iniziale nell'agosto del 1861, il reggimento divenne noto come uno dei reggimenti più disciplinati dell'Indiana a causa delle sue manovre di fanteria, che si basavano sulle tattiche di fanteria prussiana e sui segnali di tromba, e sulla buona salute generale dei suoi uomini. Durante il 1861 e il 1862 i principali scontri del reggimento includevano la battaglia di Rowlett's Station, la battaglia di Shiloh, l'assedio di Corinto e la battaglia di Stones River. Nel 1863 la 32a Indiana partecipò a tre grandi campagne: la campagna di Tullahoma, la campagna di Chickamauga e la campagna di Chattanooga. Nel 1864 il reggimento partecipò alla campagna di Atlanta e combatté nelle battaglie di Resaca.
, Adairsville, New Hope Church, Dallas, Pickett's Mill, Marietta, Kennesaw Mountain, Peachtree Creek, Atlanta, Jonesborough e Lovejoy's Station. La 32a Indiana completò il suo servizio in Texas e si schierò il 4 dicembre 1865.