Mickey è apparso per la prima volta nel cortometraggio Plane Crazy, debuttando pubblicamente nel cortometraggio Steamboat Willie (1928), uno dei primi cartoni animati sonori. Successivamente è apparso in oltre 130 film, tra cui The Band Concert (1935), Brave Little Tailor (1938) e Fantasia (1940). Mickey è apparso principalmente in cortometraggi, ma occasionalmente anche in lungometraggi. Dieci dei cartoni animati di Mickey sono stati nominati per l'Academy Award per il miglior cortometraggio d'animazione, uno dei quali, Lend a Paw, ha vinto il premio nel 1942.
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